(1)自来水下长时间冲洗，必要时用适当的刷子刷洗，硬质材料可用刀刮，然后置于自来水龙头下流水冲洗几分钟至数小时，冲洗时间视材料清洁程度而宜。一些多年生的木本植物材料，冲洗后可先用洗衣粉、肥皂或吐温等进行洗涤。易漂浮或细小的材料，装入纱布袋内冲洗。(2)植物材料浸入70%的酒精中灭菌10-30秒，然后用无菌水冲洗2-3次。(3)用灭菌剂处理，常见的表面灭菌剂有酒精、升汞、双氧水以及次氯化物。用升汞液灭菌后的材料需要用无菌水漂洗8-10次，每次不少于3分钟，以尽量去除残毒，而其他灭菌剂处理过的外植体用无菌水漂洗3-4次即可。

植物组织培养的不同阶段可以采用那些不同的灭菌和消毒方法？

实验员用酒精棉球擦手消毒，外植体可以用酒精溶液和次氯酸钠溶液消毒，培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌。

消毒剂的的选择和消毒处理时间长短取决于植物材料对消毒剂的敏感性，越幼嫩或越敏感的植物材料处理时间不宜过长，也不宜采用强消毒剂。一般植物材料首先在消毒前除去泥土或死组织，然后用水冲洗除去外部污染物，然后剥除外层表皮或组织。消毒时可先在70%酒精中浸泡数秒以除去空气气泡，用1.0%次氯酸钠消毒10~30分钟，或或用0.1%升汞消毒5~15分钟，之后用无菌水冲洗3~5次后接种。所用消毒液与外植体体积大致为1比10。有时为了增强消毒效果，可以采取以下一种或几种办法：将植物材料在灭菌前用十分清洁的流水（或自来水）冲洗0.5~2小时，在消毒剂中加入1滴或数滴吐温-20或80（浓度为0.08%~0.12%），在消毒过程中不时搅拌或振荡，在真空中进行消毒，多种消毒剂多次消毒处理或复合消毒处理，采用杀虫剂和杀菌剂进行表面消毒处理或适量地加入培养基

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